Микробиология руководство к Лабораторным Занятиям

Микробиология руководство к Лабораторным Занятиям.rar
Закачек 3663
Средняя скорость 8092 Kb/s

Микробиология руководство к Лабораторным Занятиям

Год выпуска: 2002

«Микробиология — Руководство к лабораторным занятиям»

Общая микробиология

МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

  1. Виды микроскопии. Назначение и принципы применения
  2. Методы приготовления и окраски препаратов

ФИЗИОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

  1. Питание бактерий. Культивирование бактерий. Искусственные питательные среды
  2. Рост и размножение бактерий. Колонии микроорганизмов. Пигментообразование
  3. Ферменты бактерий. Методы изучения ферментативной активности бактерий и их использование для идентификации бактерий
  4. Дыхание бактерий. Брожение. Методы выделения чистых культур анаэробов
  5. Культивирование вирусов
  6. Генетика микроорганизмов

ЭКОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

  1. Распространение микроорганизмов в природе
  2. Микрофлора организма человека
  3. Действие факторов внешней среды на микроорганизмы

ФИТОПАТОГЕННЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ. МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО СЫРЬЯ И ГОТОВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

  1. Фитопатогенные микроорганизмы. Микробное загрязнение лекарственного сырья и готовых лекарственных средств. Фармакопейные требования к микробиологической чистоте субстанций, вспомогательных веществ и готовых лекарственных средств, методы ее определения
  2. Стерильные лекарственные средства. Понятие о пирогенах. Методы определения стерильности лекарственных средств
  3. Основы химиотерапии

ИНФЕКЦИЯ И ИММУНИТЕТ

  1. Инфекция. Экспериментальная инфекция
  2. Иммунитет. Неспецифические и специфические факторы защиты организма. Основы клинической иммунологии
  3. Реакции антиген — антитело
  4. Иммунотропные препараты

МИНИСТЕРСТВО ОХРАНЫ ЗДОРОВЬЯ УКРАИНЫ

НАЦИОНАЛЬНЫЙ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

К 200-летию НФаУ

РУКОВОДСТВО КЛАБОРАТОРНЫМ ЗАНЯТИЯМ

для студентов высших учебны х заведений

доктора медицинских наук, профессора И. Л. Дикого

Харьков Издательство НФаУ «Золотые страницы»

УДК 373.167.1 ББК 52.64

Рекомендовано М инистерством образования и науки Украины (письмо № 14/18.2-1151 от 03.06.2002).

Авторы: И. Л. Дикий, И. И. Сидорчук, И. Ю. Холупяк, Н. Е. Шевелева, М. М. Великая, Н. А. Волкова, Л. Ф. Силаева, М. Ю. Стегний, О. П. Стрилец, О. Г. Гейдерих, В. Е. Литаров.

Рецензенты: А.Я. Цыганенко, профессор Харьковского государственно­ го медицинского университета;

Г.П. Палий, доктор медицинских наук, профессор Винницкого госу­ дарственного медицинского университета.

Микробиология: Руководство к лаборатор. занятиям: Учеб. М59 пособие для студентов высш. учеб. заведений / И. Л. Дикий, И. И. Сидорчук, И. Ю. Холупяк и др. — X.: Изд-во НФаУ: Золотые

страницы, 2002. — 444 с.

В пособии представлены современные методы лабораторных иссле­ дований в области микробиологии, вирусологии, паразитологии и им­ мунологии. Изложены методы идентификации возбудителей инфекци­ онных болезней.

Издание рассчитано на студентов и преподавателей фармацевтиче­ ских и медицинских вузов, врачей-бактериологов, вирусологов и имму­

УДК 373.167.1 ББК 52.64

© Д икий И. Л ., Сидорчук И. И., Холупяк И. Ю.,

Ш евелева Н. Е., Великая М. М., Волкова Н. А.,

Силаева Л. Ф ., Стегний М .Ю ., Стрилец О. П ., ISBN 966-615-133-2 Гейдерих О. Г., Литаров В. Е., 2002

Современная фармация — это интенсивно развивающаяся, мно­ гофункциональная отрасль естествознания и народного хозяйства, объединяющая наряду с разработкой и производством лекарственных препаратов фундаментально-прикладные достижения химических, фармацевтических, биологических, медицинских и инженерных наук.

В соответствии с этим Национальная фармацевтическая академия Украины, определяя перспективы развития отечественной фармации и обеспечения ее соответствующими кадрами, проводит подготовку спе­ циалистов новой формации по специальностям: классическая фар­ мация, промышленная фармация, биотехнология, технология произ­ водства косметических средств, клиническая фармация, ветеринарная фармация, лабораторная диагностика.

Применительно к дисциплине «Микробиология» такая разнопла­ новость специальностей в системе фармацевтического образования требует принципиального пересмотра действующей учебной програм­ мы, адаптации ее к новым специальностям, углубленного изучения и освоения не только классических, но и инновационных методик и тех­ нологий бактериологических, вирусологических и иммунологических исследований.

Созданное с учетом этих требований руководство по микробиоло­ гии состоит из двух разделов — общей и специальной микробиологии, в которых соответственно излагаемой тематике в полном объеме пред­ ставлен информационно-методический и справочный материал, опре­ делены вопросы для самоподготовки, сформулированы задания и опи­ сан ход выполнения лабораторных работ.

Руководство рассчитано на студентов высших фармацевтических учебных заведений, врачей-лаборантов, представляет научно-практи- ческий интерес для бактериологов, вирусологов, иммунологов и био­ технологов.

УСТРОЙСТВО МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ И ПРАВИЛА РАБОТЫ В НЕЙ

М икробиологическая лаборатория в зависимости от ее профиля обеспечивается необходимым для работы количеством помещений, среди которых гардероб для персонала, препараторская, бактериоло­ гическая комната с боксами для работы с отдельными группами бакте­ рий и вирусов, средоварочная, моечная, стерилизационная, виварий с раздельным содержанием здоровых и подопытных животных. Поме­ щения лаборатории, в которых проводится работа с возбудителями заразных болезней, располагаются в отдельном здании или его изоли­ рованной части и имеют не менее двух входов.

Лабораторию оборудуют водопроводом, канализацией, центральным отоплением, обеспечивают электроэнергией, горячим водоснабжением и газифицируют.

Все помещения лаборатории обеспечиваются естественным и ис­ кусственным освещением, отвечающим требованиям, предусмотрен­ ным строительными нормами и правилами. Рабочие столы в лаборато­ рии размещаются так, чтобы свет падал с левой стороны.

Помещения лаборатории оборудуют легко открываемыми фрамуга­ ми (форточками), которые в летнее время закрываются мелкоячеисты­ ми сетками.

Стены в лабораторных помещениях облицовывают кафелем высо­ той в 1,5 м или красят масляной краской светлых тонов; в боксах и вива­ рии стены и потолок красят масляной краской. Полы покрывают лино­ леумом, в боксах и виварии — гладкой плиткой.

Лабораторную мебель красят масляной или эмалевой краской свет­ лых тонов, рабочие поверхности столов покрывают пластиком или дру­ гим материалом, не портящимся от применения дезинфектантов. Внут­ ренняя и наружная поверхность мебели должна быть без щелей и пазов, затрудняющих проведение дезинфекции.

Температура воздуха в лабораторных помещениях поддерживается в пределах 18—21 °С, в районах с жарким климатом они оборудуются кондиционерами.

Каждый сотрудник лаборатории должен иметь закрепленное за ним рабочее место. Перед началом работы надевается спецодежда, которая хранится в индивидуальных шкафчиках отдельно от верхней одежды. Тип защитного костюма и частота его смены определяются в зависимо­ сти от характера работы.

Выполняя микробиологические исследования, необходимо соблю­ дать следующие правила:

s с инфицированным материалом работать только с помощью инст­ рументов (пинцеты, петли, корнцанги и пр.);

s запрещается прикасаться руками к исследуемому материалу и кон­ денсату в засеянных чашках;

S перед работой тщательно проверять целость стеклянной посуды, проходимость игл и надежность поршней шприцев;

s при посеве материала делать надпись на пробирках, чашках Петри, колбах, флаконах с названием номера анализа (культуры) и даты посева;

J в пробирки и чашки Петри материал высевать вблизи от огня горел­ ки с обжиганием петли, шпателя, краев пробирки;

s во время работы все чашки с посевами помещать в кюветы или на подносы, пробирки — в штативы;

s растворы, содержащие патогенные микроорганизмы, набирать пи­ петкой с помощью резинового баллона;

s нельзя насасывать ртом или переливать растворы из сосуда в сосуд через край;

s по окончании работы запрещается оставлять на рабочих столах не­ фиксированные мазки, чашки Петри, пробирки и другую посуду с инфицированным материалом.

Доставлять инфицированный материал в лабораторию и перено­ сить его из одной лаборатории в другую на территории учреждения нужно в специально приспособленной посуде (металлических биксах, ящиках, баках).

В комнатах, предназначенных для обработки и посева инфекцион­ ного материала, нельзя проводить другие работы, выращивать цветы, держать домашних животных.

Принимать пищу, пить, курить, хранить продукты питания в поме­ щениях, где работают с материалом, зараженным патогенными микро­ организмами или подозрительным на такое заражение, запрещается.

Центрифугирование инфекционного материала проводит специ­ ально обученный персонал. Если в процессе центрифугирования

разбивается пробирка, содержащая инфекционный материал, центрифугу отключают от сети, дезинфицируют, а загрязненные места очищают.

Термостаты и термостатные комнаты, предназначенные для выра­ щивания патогенных микроорганизмов, дезинфицируют не реже одно­ го раза в месяц.

При хранении инфекционных материалов в холодильнике необхо­ димо принимать меры, предупреждающие его инфицирование. Оттаи­ вание холодильника, предусмотренное правилами эксплуатации, нуж­ но совмещать с его дезинфекцией.

В процессе эксплуатации паровых стерилизаторов, помимо выполне­ ния «Правил устройства и безопасности эксплуатации сосудов, работаю­ щих под давлением», необходимо соблюдать следующие требования:

s сдавать под расписку лицу, работающему на паровом стерилизато­ ре, опломбированные баки и другую посуду с инфекционным мате­ риалом, не открывать их до стерилизации;

s вести журнал стерилизации;

s при открывании крышки парового стерилизатора защищать руки от ожогов;

S обеззараживать в конце рабочего дня помещение стерилизацион­ ной.

До начала работы помещение лаборатории убирают влажным спо­ собом. Пыль с поверхности столов, приборов, оборудования, под­ оконников стирают чистой тряпкой, увлажненной дезинфицирующим раствором. Полы протирают тряпкой, смоченной 3 % раствором хлор­ амина (карболовой кислоты).

В ходе работы и по ее окончании применяют следующие способы дезинфекции:

s использованные при лабораторных исследованиях предметные стекла, пипетки, шпатели погружают на сутки в банки с дезинфи­ цирующим раствором, затем моют и кипятят;

S отработанные чашки Петри и пробирки с посевами патогенных культур, посуду с использованным материалом, взятым от инфек­ ционных больных, собирают в банки с крышками и стерилизуют паром под давлением;

S трупы зараженных животных помещают в сосуд с дезинфицирую­ щим раствором и по окончании рабочего дня сжигают в специаль­ ных печах (крематориях) или автоклавируют в течение часа при

температуре 120 °С;

S поверхности рабочих столов обрабатывают дезинфицирующим ра­ створом;

s помещения боксов дезинфицируют с помощью бактерицидных ламп и путем обтирания оборудования, стен и столов дезинфици­ рующим раствором, бактерицидные лампы включают только в от­ сутствие персонала;

s руки обмывают дезинфицирующим раствором с последующим мытьем с мылом.

Во время проведения дезинфекционных работ персонал лаборато­ рии обязан надевать резиновые перчатки.

При перерыве в работе с инфекционным материалом, выходе из по­ мещения лаборатории, бокса, а также по окончании работы, уборки ра­ бочего места и помещений лаборатории сотрудники должны дезинфи­ цировать руки и мыть их с мылом.

В лаборатории должна быть укомплектованная аптечка для экс­ тренной профилактики и оказания медицинской помощи. В аптечке необходимо иметь: этиловый спирт, настойку йода, сухой марганцово­ кислый калий, перевязочные средства, сухие навески протаргола и азот­ нокислого серебра, а также необходимый набор антибиотиков.

Раздел 1. МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

Тема: ВИДЫ МИКРОСКОПИИ. НАЗНАЧЕНИЕ И ПРИНЦИПЫ ПРИМЕНЕНИЯ

Цель: Ознакомиться с принципами и методами изучения морфоло­ гии микроорганизмов.

Микроорганизмы можно увидеть при помощи оптического прибо­ ра — микроскопа. Микроскоп (от греч. micros — малый и scopeo — смот­ рю) служит для изучения малых объектов, невидимых невооруженным глазом. В микробиологии микроскоп используется для исследования как живых, так и убитых микробов в окрашенном или неокрашенном виде. В микробиологической практике, в зависимости от целей объектов ис­ следования, применяют различные виды микроскопии: светопольную, темнопольную, фазово-контрастную, аноптральную, люминесцентную, электронную.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМ ОПОДГОТОВКИ

1. Виды микроскопии: светопольная, темнопольная, фазово­ контрастная, аноптральная, люминесцентная, электронная.

2. Устройство светопольного микроскопа и правила работы с ним. Иммерсионная система увеличения.

СПИ СОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Елинов П.П., Заикина Н.А., Соколова И.П. Руководство к лабораторным заня­ тиям по микробиологии.— М.: Медицина, 1988,— С. 9-35.

СВЕТОПОЛЬНАЯ М И К РО С К О П И Я . УСТРОЙСТВО СВЕТО П О ЛЬН О ГО М И КРО СКО П А И ПОРЯДОК РАБОТЫ С НИМ

Обычная светопольная (или световая) микроскопия предназначена для изучения окрашенных микроскопических препаратов, которые ин­ тенсивно поглощают свет.

На рис. I изображен светопольный биологический микроскоп. Его механическая часть состоит из основания (или штатива), коробки с микромеханизмом, предметного столика, тубусодержателя, бинокуляра, револьвера с объективами.

В штативе различают нижнюю часть (или ножку) и верхнюю часть (или колонку). К колонке, которая служит ручкой для переноса мик­ роскопа, прикреплен подвижный предметный столик, на который по­ мешается исследуемый объект. Он имеет центрировку и при помощи винтов передвигает препарат в двух взаимно перпендикулярных на­ правлениях. Отсчет перемещения в обоих направлениях может произ­ водиться по шкалам и нониусу с точностью до 0,1 мм.

К верхней части колонки присоединяется труба микроскопа — ту­ бус. Тубус является подвижной трубкой, к которой прикрепляются линзы, служащие для увеличения исследуемого объекта. Тубус приво­ дится в движение вверх и вниз двумя системами винтов: макровинтом и микровинтом для тонкой фокусировки.

Рис. 1. Светопольный биологический микроскоп:

1 — окуляр (бинокуляр); 2 — тубус; 3 — головка для крепления тубуса и револьвера; 4 — револьвер; 5 — объектив; 6 — предметный столик; 7 — тубусодержатель; 8 — микрометрический винт; 9 — макрометрический винт; 10 — конденсор с диафрагмой; 11 — основание; 12 — осветитель

Для грубой наводки служит зубчатка, или кремальера, приводимая

в движение макрометрическим винтом. Этим винтом пользуются при

Опубликовано вс, 01/03/2015 — 16:18 пользователем admin

В приведенном руководстве к лабораторным работам «Микробиология» под редакцией Дикого говорится об общей микробиологии. Этой теме посвящен первый раздел книги и вмещает он информацию о морфологии микроорганизмов, видах микроскопии, описан их принцип использования, а также назначение. Вторая глава посвящена методам подготовки и окрашивания препаратов, а также физиологии микроорганизмов. Автор также акцентирует внимание на бактериях, их питании и культивировании, искусственных питательных средах.

В описываемом учебном пособии говориться о вирусах, их культивировании, генетике микроорганизмов, а также об их экологии. Освещены и темы, касающиеся:

  • Микрофлоры человеческого организма;
  • Основы химиотерапии;
  • Инфекции и экспериментальной инфекции;
  • Иммунотропных препаратов;

Вторая часть пособия раскрывает вопросы, которые касаются патогенных кокков, возбудителей кампилобактериоза, дифтерии, коклюша и паракоклюша. Говорится о патогенных спирохетах, грибах, хламидиях и других. Не менее подробно описаны вирусы гепатита А, В. Это также касается вируса полиемиелита и многих других.


Статьи по теме